ТРАНСГЕНФАРМ
Биотехнологический центр трансгенеза
в фарминдустрии


("ТРАНСГЕНФАРМ")
ТРАНСГЕНФАРМ

Получение трансгенных животных

Для Вас мы:

Алексей Дейкин, руководитель группы,

Тел.:    +7 499 135-99-15
Факс.:+7 499 135-41-05
E-mail:E-mail




Группа по получению трансгенных мышей


Дейкин, Ермолкевич
    На заднем плане справа налево: к.б.н. н.с. А.В. Дейкин, ст. лаб.-исслед. А.Б. Еляков, на переднем плане справа налево: аспирант М.Э Привезенцева, м.н.с Т.Г. Ермолкевич, к.б.н. н.с. Д.А. Андреев

Наше оборудование






Помещения для содержания и работы с мышами.








Доение мышей.



Разработчик технологии: м.н.с. Татьяна Георгиевна Ермолкевич

Ермолкевич


Самые высокоудойные мыши России дают молоко для науки. РИА Новости 05-07-2010





Микроинъекция ДНК содержащей ген лактоферрина человека в пронуклеус зигот мыши






Результаты экспериментов по получению мышей, трансгенных по гену лактоферрина человека





Конструкт


Микроинъеци-

ровано

зигот



Использовано

реципиентов


Пересажено

эмбрионов

одному

реципиенту,

Родилось мышат

Трансгенные животные


Всего

% от

транспланти-

рованных

зигот



Всего

% от родившихся

мышат

% от

транспланти-

рованны

зигот

hLf1 *

353

18

19,61

24

6,80

1

4,17

0,28

hLf2

400

19

21,05

13

3,25

6

46,15

1,50

hLf3

610

38

16,06

92

15,08

18

19,48

3,01

hLf4 *

359

15

23,93

21

5,85

5

23,81

1,39

hLf5

380

24

15,81

36

9,47

10

28,57

3,16

hLf6 *

217

15

14,47

12

5,53

3

16,67

0,92

hLf7

358

21

17,05

121

33,80

16

13,22

4,47

hLf8

257

16

16,06

92

35,80

5

5,43

1,95

Всего

2934

166

18

411

14,44

64

19,69

2,01


*Генные конструкты, не давшие экспрессии лактоферрина с молоком трансгенных животных




Мыши, трансгенные по гену лактоферрина человека.



goat lactoferrin men

K- - нетрансгенная мышь
K+ - человеческая ДНК
Tr - мышиные трансгены с разной копийностью



Трансмиссия трансгенов hLf3, hLf5, hLf7 при скрещивании первичных трансгенных самок и самцов мышей с нетрансгенными мышами.



Конструкт

Первичные

трансгены,

F1

F2

Исследовано

потомков,

гол.

Трансгены, гол.

Исследовано

потомков,

гол.

Трансгены, гол.

Всего


Всего

Размножение первичных трансгенных самок

hLf3

263, 277, 385, 1118

93

29 (31%)

13 (45%)

16 (55%)

43

9 (21%)

4 (44%)

5 (56%)

hLf5

112, 116, 146,

39

27 (69%)

13 (48%)

14 (52%)

131

66 (50%)

32 (48%)

34 (52%)

hLf7

643, 787, 790, 793, 809

93

21 (23%)

15 (71%)

6 (29%)

82

37 (45%)

14 (38%)

23 (62%)

Всего

225

77 (34%)

41 (53%)

36 (47%)

256

112 (44%)

50 (45%)

62 (55%)

Размножение первичных трансгенных самцов

hLf3

281, 373, 382, 398, 1112

154

52 (31%)

20 (38%)

32 (62%)

158

74 (47%)

35 (48%)

39 (52%)

hLf5

113, 138, 145, 172

162

40 (28%)

19 (45%)

21 (55%)

82

27 (38%)

15 (53%)

12 (47%)

hLf7

516, 699, 704, 803, 825, 864

248

78 (31%)

34 (44%)

44 (56%)

125

46 (47%)

24 (57%)

22 (43%)

Всего

564

170 (30%)

73 (43%)

97 (57%)

365

147 (40%)

74 (50%)

73 (50%)





Некоторые результаты получения и исследования мышей, трансгенных по гену лактоферрина человека


Гистологический анализ трансгенных мышей
Гистологический анализ трансгенных мышей
Гистологический анализ трансгенных мышей
Гистологический анализ трансгенных мышей
Гистологический анализ трансгенных мышей
Гистологический анализ трансгенных мышей

№ - номер животного
m - самец
f - самка
k - контроль
t - трансген

"Результаты работы опубликованы в статье А.В. Дейкин, Т.Г. Ермолкевич, И.Л. Гольдман, Я.Г. Гурский, А.Н. Краснов, А.Н. Попов, С.Г. Георгиева, С.Л.Кузнецов, В.Г. Деревянко, Н.И. Новикова, А.Н. Мурашев, Е.Р. Садчикова. СОСТОЯНИЕ ЗДОРОВЬЯ И ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНАЯ СПОСОБНОСТЬ ТРАНСГЕННЫХ МЫШЕЙ, ПРОДУЦИРУЮЩИХ С МОЛОКОМ РЕКОМБИНАНТНЫЙ БЕЛОК ЧЕЛОВЕКА ЛАКТОФЕРРИН. ДАН, 2009,427(4): 545-548"




"Некоторые результаты работ по получению трансгенных мышей по генам α-цепи Т-клеточного рецептора гибридомы клеток памяти CD8+ 1D1 и β-цепи Т-клеточного рецептора аутореактивной Т-клеточной гибридомы. Обе гибридомы получены и охарактеризованы в лаборатории механизмов регуляции иммунитета НИИ Канцерогенеза РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН.
Трансгенные мыши получены Ю.Ю. Силаевой

ТРАНСГЕНФАРМ

А - Электрофоретическое исследование ПЦР продукта (праймеры к α-цепи Т-клеточного рецептора гибридомы клеток памяти CD8+ 1D1)
Б - Электрофоретическое исследование ПЦР продукта (праймеры к гену RAG1)

1-5 - матрица - ДНК мышей, рождённых после микроинъекции гена
+ - ДНК исходной гибридомы
W.T. - ДНК мышей дикого типа

ТРАНСГЕНФАРМ ТРАНСГЕНФАРМ

Цитофлуориметрическое исследование периферической крови мышей дикого типа (А) и первичного трансгена по гену β-цепи Т-клеточного рецептора гибридомы клеток памяти CD8+ 1D1 (Б). Клетки крови окрашивали антителами к Vα11, конъюгированными с флуорохромом FITC-A

ТРАНСГЕНФАРМ

TGb 7hybr - Электрофоретическое исследование ПЦР продукта (праймеры к β-цепи Т-клеточного рецептора аутореактивной Т-клеточной гибридомы)
GAPDH Электрофоретическое исследование ПЦР продукта (праймеры к гену GAPDH)

1-3 - матрица - ДНК мышей, рождённых после микроинъекции гена
+к - ДНК исходной гибридомы
W.T. - ДНК мышей дикого типа



"Результаты работы опубликованы в статье Е. С. Звездова, Ю.Ю. Силаева, М.С. Вагида, Е.В. Марюхнич, А. В. Дейкин,Т. Г. Ермолкевич, С.Г.Кадулин, Е.Р.Садчикова, И.Л.Гольдман, Д. Б. Казанский. Создание трансгенных животных, экспрессирующих - и -цепи аутореактивного TCR. Молекулярная биология. В печати."







Операции на козах.



Работа с трансгенами-2 Операция по хирургическому промыванию яйцеводов коз.Экперимент и фотографии выполнены в Южной Корее (Youn W.S., Lee C.S., Goldman I.L., Fang N.Z., Koo D.B., Han Y.M., Shin S.T., Yoo O.J., Park C.S., and Lee K.K. Studies on the superovulation and collection of microinjectable embryos in Korean native goats (Capra hircus aegagrus). Korean J. Animal Reprod., 1997, V. 21, N 4, pp. 373-379.)


Работа с трансгенами-1
Рис.1 Подготовка операционного поля.
Работа с трансгенами-2
Рис.4. Катетеризация яйцевода.
Работа с трансгенами-1
Рис.2.Вскрытие брюшины.
Работа с трансгенами-2
Рис.5.Промывание яйцеводов.
Работа с трансгенами-1
Рис.3. Извлечение матки из брюшной полости.
Работа с трансгенами-2
Рис.6.Зашивание операционной раны.     





Стажёры 2010-2011 г.г.



Работа с трансгенами   Работа с трансгенами   Работа с трансгенами
Привезенцева
Мария Эдуардовна
Еляков
Алексей Борисович
Андреев
Дмитрий Анатольевич



Стажёры 2008 года



Работа с трансгенами-1 Работа с трансгенами-1 Работа с трансгенами-1

Юлия Юрьевна
Силаева

Сергей Александрович
Барилко

Мария Эдуардовна
Королёва
Научно-исследовательский институт канцерогенеза РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН Удмуртский государственный университет Российский государственный
аграрный университет - Московская Сельскохозяйственная Академия
имени К.А.Тимирязева
Лаборатория механизмов регуляции иммунитета Факультет медицинской биотехнологии Зооинженерный факультет,
кафедра генетики и разведения сельскохозяйственных животных.
Научный сотрудник Студент, 5 курс Студентка, 5 курс





Стажировка сотрудников РУП НПЦ по Животноводству НАН Беларуси и ГНУ ВНИИЖ Россельхозакадемии по технике микроинъекции генов в пронуклеус зигот животных и культивированию эмбрионов. 03.05 - 14.05 2006 г. и 05.02. - 09.02.2007 г.



Работа с трансгенами-1

Работа с трансгенами-2
Работа с трансгенами-1

Работа с трансгенами-2







22 августа 2008 года ИБГ РАН посетил Спикер Совета Федерации Федерального собрания России Сергей Михайлович Миронов. Во время знакомства с работой Института С.М. Миронов микроинъецировал ДНК с геном лактоферрина человека в пронуклеус зиготы мыши.



Работа с трансгенами-1 Работа с трансгенами-2 Работа с трансгенами-2

Работа с трансгенами-1 Работа с трансгенами-2 Работа с трансгенами-2

Работа с трансгенами-1 Работа с трансгенами-2 Работа с трансгенами-2

Работа с трансгенами-1 Работа с трансгенами-2 Работа с трансгенами-2

Видеорепортаж - Миронов в ИБГ


  Яндекс цитирования     PCR-RUS         АгроПоиск - аграрная поисковая система

© 2004-2015 "ТРАНСГЕНФАРМ"

Дата последней модификации страницы:    Sunday, 26-Feb-2012 19:50:14 MSK